HPLC用的乙腈與甲醇的區別

1、首先，乙腈價(jià)格高

　　乙腈，特別是HPLC級的價(jià)格很高，但是，文獻或LC廠(chǎng)家所示的條件，多用乙腈，這是為什么呢？現就此談?wù)劇?/span>

2、壓力

　　乙腈低，柱內承受的壓力，根據有機溶劑的種類(lèi)或混合比率的不同而異，水/乙腈，水/甲醇混合液的比率與輸液壓力的關(guān)系中，甲醇與水混合，壓力增高，而乙腈同樣與水混合且并不如此。所以，乙腈一方，在同樣的流速下不在柱內加上多余的壓力。

3、吸光度

　　乙腈HPLC級的小。乙腈和甲醇的市銷(xiāo)HPLC級和優(yōu)級的吸收光譜中，乙腈HPLC吸收zui?。ㄌ貏e是在短波長(cháng)上?。?。所謂HPLC級是除去具有吸收UV的雜質(zhì)，在規定的波長(cháng)上吸光度限制在規格值以?xún)?。在UV檢測時(shí)，產(chǎn)生的噪聲小，因此在進(jìn)行UV短波長(cháng)上的高靈敏度分析時(shí)乙腈HPLC級zui適宜。另外，在UV檢測中的梯度基線(xiàn)上也是乙腈HPLC級產(chǎn)生鬼峰少，雖然，其他與水相溶性高的有機溶劑有各種各樣，但很難能找到比乙腈HPLC級吸收更小的。另外，甲醇的HPLC級和優(yōu)級，雖然所得的光譜相差不大，但是優(yōu)級不能保證吸光度，有可能產(chǎn)生偏差，價(jià)格也相差不大，所以盡量使用HPLC級。

4、分離(洗脫)的選擇性

　　兩者的差異，乙腈和甲醇在分離的選擇性上不同。由于有機溶劑分子的化學(xué)性質(zhì)(甲醇和乙醇是質(zhì)子性，乙腈和四氫呋喃是非質(zhì)子性)不同所致。因此，在用乙腈類(lèi)不能獲得分離的選擇性，就試用甲醇類(lèi)看看。

5、洗脫能力

　　一般而言，乙腈較強。乙腈和甲醇分別用同樣的比率與水混合時(shí)，一般情況下，乙腈的洗脫能力強。特別是混合比率低時(shí)，從苯酚的洗脫來(lái)看，獲得同樣的保留時(shí)間，乙腈的比率，只需甲醇的比率的一半以下即可。另一方面，有機溶劑100%或與此極接近時(shí)，從胡蘿卜素和膽甾醇來(lái)看，常常都是甲醇的洗脫能力強?；旌媳仍?0比1等較為特殊時(shí)，調制的誤差大，影響保留時(shí)間，或平衡化的時(shí)間長(cháng)，乙腈遇到這種情況時(shí)，用甲醇的10比1混合代替乙腈，這樣操作方便些。溶劑受溫度影響時(shí)，不采用容器定量，而采用重量的方法(考慮比重)，可使混合比的誤差減小。

6、峰形

　　用時(shí)出現差異。像水楊酸化合物(在鄰位上具有羧基或甲氧基的苯酚化合物)等，用乙腈類(lèi)時(shí)拖尾大，用甲醇類(lèi)可抑制?？墒?，一般情況下，聚合物類(lèi)反相柱，與硅膠柱相比，更具有峰形寬的傾向，特別是用聚苯乙烯分析柱芳香族化合物等時(shí)常見(jiàn)。這在流動(dòng)相是甲醇時(shí)非常顯著(zhù)，而用乙腈時(shí)不明顯。為此，用聚合物類(lèi)反相用柱時(shí)建議采用后者(乙腈類(lèi))，這是因為乙腈使凝膠膨潤。

7、流動(dòng)相的脫氣，乙腈類(lèi)要注意

　　混合溶劑的置制，不說(shuō)在LC裝置內，只談預先在流動(dòng)相瓶?jì)冗M(jìn)行時(shí)，(等濃度系統)。甲醇與水混合時(shí)發(fā)熱，多余的溶解空氣較易變?yōu)槊摮鰵馀?脫氣容易)。而乙腈由于吸熱冷卻，隨著(zhù)慢慢回到室溫，產(chǎn)生氣泡，所以要考慮脫氣(加溫攪拌，過(guò)濾膜，He脫氣等)。

8、結論

　　以上反相色譜法流動(dòng)相常用的乙腈和甲醇進(jìn)行了比較。粗略地講是，使用乙腈HPLC級，在選擇性，峰形差時(shí)試用甲醇HPLC，但根據各種不用性質(zhì)設計分析條件也是必要的。