液相色譜柱使用注意事項

(1)液相色譜柱色譜柱使用前注意事項：

    液相色譜柱的儲存液無(wú)特殊說(shuō)明，均為評價(jià)報告所示的流動(dòng)相。在使用前，一定要注意液相色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動(dòng)相是否互溶。在反相色譜中，如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑，應先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過(guò)渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出，堵塞色譜柱。

(2)流動(dòng)相：

   流動(dòng)相中所使用的各種有機溶劑要盡可能使用色譜純，配流動(dòng)相的水是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動(dòng)相再經(jīng)過(guò)0.45μm的濾膜過(guò)濾一次則更好，尤其是含鹽的流動(dòng)相。另外，裝流動(dòng)相的容器和色譜系統中的在線(xiàn)過(guò)濾器等裝置應該定期清洗或更換。

  以常規硅膠為基質(zhì)的鍵合相填料通常的pH值適用范圍是2.0-8.0。當必須要在pH值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時(shí)，每次使用結束后立即用適合于色譜柱儲存并與所使用的流動(dòng)相互溶的溶劑清洗，并*置換掉原來(lái)所使用的流動(dòng)相。

(3)樣品：

   樣品也要盡可能清潔，可選用樣品過(guò)濾器或樣品預處理柱（spe）對樣品進(jìn)行預處理；若樣品不便處理，要使用保護柱。在用正相色譜法分析樣品時(shí)，所有的溶劑和樣品應嚴格脫水。

色譜柱的保存

(1)反相液相色譜柱色譜柱每天實(shí)驗后的保養：

   使用緩沖液或含鹽的流動(dòng)相，實(shí)驗完成后應用10%的甲醇/水沖洗30分鐘，洗掉色譜柱中的鹽，再用甲醇沖洗30分鐘。注意：不能用純水沖洗柱子，應該在水中加入10%的甲醇，防止將填料沖塌陷。

(2)長(cháng)期保存色譜柱：

   如色譜柱要長(cháng)時(shí)間保存，必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以?xún)Υ嬗诩兗状蓟蛞译嬷?，正相柱可以?xún)Υ嬗趪栏衩撍蟮募冋和橹?，離子交換柱可以?xún)Υ嬗谒ê栏瘎?或柳硫汞）中，并將購買(mǎi)新色譜柱時(shí)附送的堵頭堵上。儲存的溫度是室溫。

色譜柱在使用過(guò)程中易出現的問(wèn)題和解決辦法

   色譜柱在使用中zui常見(jiàn)的問(wèn)題就是柱壓升高，如果柱壓是在長(cháng)時(shí)間使用過(guò)程中緩慢增加，屬于正?，F象，但柱壓在使用過(guò)程中突然升高（系統管路堵塞及壓力傳感器故障除外），可能的原因有如下幾點(diǎn)：

(1)色譜柱頭的過(guò)濾篩板堵塞或污染；

(2)色譜柱頭的填料被樣品污染；

(3)色譜柱內緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑，形成結晶析出；

(4)流動(dòng)相pH值過(guò)大或過(guò)小使固定相結構破壞或溶解。

解決辦法如下：

(1)如確定是色譜柱頭的過(guò)濾篩板被污染，可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力，或者卸下色譜柱頭，將其放在10%的稀硝酸內超聲清洗10分鐘，后再用純水超聲10分鐘，重新裝入色譜柱。

(2)如確定色譜柱頭的填料被污染，將柱頭螺絲卸下，挖出柱內前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔細修復后，重新安裝上柱頭螺絲。

(3)如確定定是鹽結晶，用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內鹽全部溶解，再換高濃度甲醇。

(4)如果因pH值使用不當，很難恢復。