液相色譜儀故障的判定及維修

出現肩峰或分叉

1、樣品體積過(guò)大 用流動(dòng)相配樣,總的樣品體積小于*峰的15%

2、樣品溶劑過(guò)強 采用較弱的樣品溶劑

3、柱塌陷或形成短路通道 更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件

4、柱內燒結不銹鋼失效 更換燒結不銹鋼,加在線(xiàn)過(guò)濾器,過(guò)濾樣品

5、進(jìn)樣器損壞 更換進(jìn)樣器轉子

鬼峰

1、進(jìn)樣閥殘余峰 每次用后用強溶劑清洗閥,改進(jìn)閥和樣品的清洗

2、樣品中未知物 處理樣品

3、柱未平衡 重新平衡柱,用流動(dòng)相作樣品溶劑 (尤其是離子對色譜)

4、(TFA)氧化(肽譜) 每天新配,用抗氧化劑5、水污染(反相) 通過(guò)變化平衡時(shí)間檢查水質(zhì)量，用HPLC級的水

液相色譜儀保留時(shí)間變化

1、柱溫變化 柱恒溫，必要時(shí)需配置恒溫箱

2、等度與梯度間未能充分平衡 至少用10倍柱體積的流動(dòng)相平衡柱

3、緩沖液容量不夠 用>25mmol/L的緩沖液

4、柱污染 每天沖洗柱

5、柱內條件變化 穩定進(jìn)樣條件,調節流動(dòng)相

6、柱快達到壽命 采用保護柱

保留時(shí)間延長(cháng)

1、流速下降 管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內氣泡

2、硅膠柱上活性點(diǎn)變化 用流動(dòng)相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱

保留時(shí)間縮短

1、流速增加 檢查泵,重新設定流速

2、樣品超載 降低樣品量

3、鍵合相流失 流動(dòng)相PH值保持在3~7.5檢查柱的方向

4、流動(dòng)相組成變化 防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀

5、溫度增加 柱恒溫

基線(xiàn)噪聲

1、氣泡(尖銳峰) 流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓

2、污染(隨機噪聲) 清洗柱,凈化樣品,用HPLC級試劑

3、檢測器燈連續噪聲 更換氘燈

4、電干擾(偶然噪聲) 采用穩壓電源,檢查干擾的來(lái)源(如水浴等)

5、檢測器中有氣泡 流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓

峰展寬

1、進(jìn)樣體積過(guò)大 

2、在進(jìn)樣閥中造成峰擴展 進(jìn)樣前后排出氣泡以降低擴散

3、數據系統采樣速率太慢 設定速率應是每峰大于10點(diǎn)

4、檢測器時(shí)間常數過(guò)大 設定時(shí)間常數為感興趣*峰半寬的10%

5、流動(dòng)相粘度過(guò)高 增加柱溫,采用低粘度流動(dòng)相

6、檢測池體積過(guò)大 用小體積池,卸下熱交換器

7、保留時(shí)間過(guò)長(cháng) 等度洗脫時(shí)增加溶劑含量也可用梯度洗脫

8、柱外體積過(guò)大 將連接管徑和連接管長(cháng)度降至zui小

9、樣品過(guò)載 進(jìn)小濃度小體積樣品

峰拖尾

1、柱超載 降低樣品量,增加柱直徑采用較高容量的固定相

2、峰干擾 清潔樣品,調整流動(dòng)相

3、硅羥基作用 加三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動(dòng)相PH值,鈍化樣品

4、死體積或柱外體積過(guò)大 連接點(diǎn)降至zui低,對所有連接點(diǎn)作合適調整,盡可能采用細內徑的連接管

5、柱效下降 用較低腐蝕條件,更換柱,采用保護柱