色譜柱是一種裝填有固定相用以分離混合組分的柱管,一般為金屬或玻璃制作而成,有直管型、盤(pán)管型、U型管等,被廣泛用于多個(gè)領(lǐng)域中。色譜柱主要由那些部件組成呢?下面具體介紹一下色譜柱的組成部件。
色譜柱的組成部件
色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球(包括離子交換樹(shù)脂)、多孔碳等,其粒度一般為3,5,7,10μm等,柱效理論值可達5~16萬(wàn)/米。對于一般的分析只需5000塔板數的柱效;對于同系物分析,只要500即可;對于較難分離物質(zhì)對則可采用高達2萬(wàn)的柱子,因此一般10~30cm左右的柱長(cháng)就能滿(mǎn)足復雜混合物分析的需要。
色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70 kg/cm2 時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管,管內壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應,不銹鋼柱內壁多經(jīng)過(guò)拋光。也有人在不銹鋼柱內壁涂敷氟塑料以提高內壁的光潔度,其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細管柱。色譜柱兩端的柱接頭內裝有篩板,是燒結不銹鋼或鈦合金,孔徑0.2~20µm(5~10µm),取決于填料粒度,目的是防止填料漏出。
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類(lèi),尺寸規格也不同:
①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm(常用4.6mm,國內有4mm和5mm),柱長(cháng)10~30cm;
②窄徑柱(narrow bore,又稱(chēng)細管徑柱、半微柱semi-microcolumn),內徑1~2mm,柱長(cháng)10~20cm;
③毛細管柱(又稱(chēng)微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;
④半制備柱,內徑>5mm;
⑤實(shí)驗室制備柱,內徑20~40mm,柱長(cháng)10~30cm;
⑥生產(chǎn)制備柱內徑可達幾十厘米。柱內徑一般是根據柱長(cháng)、填料粒徑和折合流速來(lái)確定,目的是為了避免管壁效應。
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