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色譜柱的安裝

更新時(shí)間:2017-10-27      點(diǎn)擊次數:1576

  色譜柱的安裝
 
  1、首先應確認柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積,進(jìn)樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內徑盡可能使用內徑較小的管線(xiàn),同時(shí)控制進(jìn)樣器、色譜柱和檢測器之間連接管線(xiàn)的長(cháng)度。安裝色譜柱之前,確認流路系統中的溶劑是否正常。對分析較復雜的樣品建議安裝保護柱。
 
  2、為了使色譜柱與儀器系統達*的連接效果,應盡量使用與色譜柱接口相匹配的螺帽和錐形接頭,如原來(lái)的接頭長(cháng)期匹配其他類(lèi)型的色譜柱,建議在連接新色譜柱前應檢查匹配情況,避免造成色譜柱的損壞或因色譜柱不匹配造成的漏液。
 
  3、使用PEEK材料的通用接頭,只需用手擰緊不需要特定扳手,使用壓力為5000psi;使用溫度不得超過(guò)100℃。
 
  流動(dòng)相
 
  1、在進(jìn)行樣品檢測前,至少使用20倍柱體積流動(dòng)相使色譜柱充分平衡。流動(dòng)相一定要使用色譜級別的溶劑。如使用水相的緩沖液應當天配制以保持新鮮避免細菌產(chǎn)生。
 
  2、流動(dòng)相使用前需用微孔濾膜過(guò)濾,消除流動(dòng)相中顆粒對色譜系統和色譜柱的損壞。緩沖液與其他流動(dòng)相混合后應重新過(guò)濾避免溶解度變化造成產(chǎn)生新的沉淀。不應使用純水作為流動(dòng)相沖洗C18色譜柱,以免柱性能損壞(添加5%的有機溶劑沖洗色譜柱,同時(shí)可以達到對緩沖鹽清洗的作用。還可以使色譜柱更容易平衡)。
 
  3、流動(dòng)相需脫氣后使用,可避免因氣泡導致的泵和檢測器的工作不正常。如果測試時(shí)使用的流動(dòng)相與色譜柱保存使用的流動(dòng)相有較大區別,應該使用過(guò)度分布的形式進(jìn)行平衡。避免由于流動(dòng)相的突然變化造成柱壓增加過(guò)大或流動(dòng)相緩沖鹽結晶造成對色譜柱和儀器系統的損壞。正相色譜柱比反相色譜柱需要更長(cháng)的平衡時(shí)間。
 
  樣品制備
 
  1、樣品應當盡可能溶解在能與流動(dòng)相相互溶的溶劑中。除特殊指明外,如使用強溶劑溶解樣品柱子的分辨率將可能降低。
 
  2、樣品溶液在進(jìn)樣前應使用針頭式過(guò)濾器對樣品預先過(guò)濾。頻繁改變流動(dòng)相組成,會(huì )加速降低柱效。
 
  3、色譜柱由高壓勻漿法裝填,能承受較高壓力。為獲得*分離效果,使用時(shí)請不要超過(guò)200kgf,而且避免壓力突然上升或變化,否則會(huì )造成硅膠填料的破壞,減少色譜柱的使用壽命。除特殊要求外zui高操作溫度不要超過(guò)60℃。
 
  色譜柱的保存操作
 
  1、如果流動(dòng)相含有酸或無(wú)機鹽,應當先用去離子水(20倍柱體積)沖洗干凈。然后用用100%乙腈或甲醇保存色譜柱。zui后用柱子的接頭密封,并放在穩定的環(huán)境中存放。
 
  2、應避免色譜柱受到直接的機械沖擊或摔落,避免造成色譜柱性能的降低。
 
  色譜柱的再生
 
  用相當于20倍柱體積的溶劑按下列順序沖洗柱子,建議按柱子的箭頭方向沖洗,盡可能不反沖。沖洗時(shí)使用的的參考溶劑順序是水、甲醇、氯仿、異丙醇。
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