雙酚A,也稱(chēng)BPA,是一種廣泛應用于塑料制造的化學(xué)物質(zhì),主要用于生產(chǎn)聚碳酸酯(PC)、環(huán)氧樹(shù)脂等多種高分子材料,被廣泛用于生產(chǎn)化工產(chǎn)品和食品相關(guān)產(chǎn)品,如嬰兒奶瓶、餐具、微波爐器皿、食品包裝容器的涂層、飲料瓶以及供水管道等。研究顯示,雙酚A是一類(lèi)具有雌激素樣活性的內分泌干擾物,可能誘發(fā)兒童性早熟或致癌。
自2011年3月1日起,歐盟成員國禁止使用含雙酚A的塑料生產(chǎn)嬰兒奶瓶,并從6月1日起禁止進(jìn)口此類(lèi)塑料嬰兒奶瓶。針對雙酚A安全性問(wèn)題,現已將雙酚A檢測液相色譜法普遍應用。
雙酚A檢測液相色譜法實(shí)驗準備:
試劑:甲醇:色譜純
乙酸、無(wú)水乙醇:分析純
水:超純水(符合實(shí)驗室一級用水)
雙酚A標準物質(zhì):純度>99.0%
儀器:LC-10Tvp液相色譜儀
SPD-10Tvp紫外檢測器
手動(dòng)進(jìn)樣閥
電子天平
超聲波清洗器
超純水機
恒溫水浴鍋
雙酚A檢測液相色譜法分析條件:
色譜柱:C18色譜柱(4.6mm×250mm,5μm)
流動(dòng)相:甲醇+水=75+25
流速:0.7mL/min
柱溫:30℃
檢測波長(cháng):224nm
進(jìn)樣量:20μl
標準溶液的配置
雙酚A標準儲備液:稱(chēng)取適量的雙酚A標準物質(zhì),用甲醇稀釋?zhuān)渲贸蓾舛葹?000μg/ml的雙酚A儲備液。
雙酚A標準供試液:使用時(shí)用3%乙酸溶液稀釋成濃度為1.0μg/ml的溶液.
樣品前處理
稱(chēng)取5g的樣品,將其剪成5×5mm的小碎片,置于250ml的三角燒瓶中,加入100mL的甲醇,50℃下超聲提取2小時(shí),過(guò)濾至250mL雞心瓶,旋轉蒸發(fā)至干,用5mL水漩渦洗脫,待凈化。
樣品濃縮和凈化
E固相萃取小柱
活化、平衡:10 mL甲醇,10 mL水依次過(guò)柱;
上樣:在水到達小柱上層篩板時(shí),加入待凈化液;
淋洗:6 mL水合10 mL 30%甲醇水溶液依次淋洗小柱,流出液棄去;
洗脫:6 mL 50%乙腈水溶液洗脫,收集洗脫液。
洗脫液50℃下氮氣至近干,1mL流動(dòng)相溶解,進(jìn)樣分析。
結果與討論
由參考文獻可初步將流動(dòng)相定為甲醇與超純水,從實(shí)驗結果可知:當只針對標準物質(zhì)的測試時(shí),使用純甲醇做流動(dòng)相對雙酚A的響應效果,在檢測樣品含量時(shí),我們可發(fā)現,以純甲醇作為流動(dòng)相將會(huì )產(chǎn)生大量的溶劑峰,影響到樣品檢測結果,因此我們適當的添加一定比例的水,降低流動(dòng)相的洗脫能力,以避開(kāi)溶劑峰的影響。由于3%的乙酸溶劑峰較大,因此將甲醇:水=75:25的流動(dòng)相作為*流動(dòng)相,其中可根據不同樣品的性質(zhì)我們也可靈活利用色譜條件。
波長(cháng)的選擇: 經(jīng)過(guò)二級陣列管檢測器全波段掃描可知:雙酚A在200nm至400nm波長(cháng)范圍內有三個(gè)zui大吸收峰,分別為200nm、224nm、280nm,由于考慮到流動(dòng)相的影響,200nm在流動(dòng)相甲醇的截至波長(cháng)(210nm)內因此不予考慮,而雙酚A在224nm處的響應度比在280nm處的響應度高,因此將*波長(cháng)選定為224nm。
陰性和系統適用性試驗
不加入樣品,加入試劑,按樣品處理方法進(jìn)行測定,在組分相應保留時(shí)間處沒(méi)有吸收;適當的更改色譜條件中的流速、流動(dòng)相比例、色譜柱品牌檢測,均能符合相應的參數條件;其中取標樣10μl進(jìn)樣檢測,雙酚A的理論板數大于7000。
精密度和重現性實(shí)驗
取雙酚A標準供試液,進(jìn)樣6針,每次10ul,進(jìn)行測定,考察該組分精密度及重現性的相對標準偏差,精密度相對標準偏差為0.49%,重現性相對標準偏差為0.095%。
線(xiàn)性關(guān)系和檢測限
在本方法確定的色譜條件下,雙酚A濃度為0.1008ug/ml-1008.2ug/ml范圍內,線(xiàn)性關(guān)系良好,其峰面積-濃度的線(xiàn)性方程為:y = 10.537x+14.293,相關(guān)系數R2=0.9999;在 S/N =3的條件下,本方法zui低檢測限為0.038mg/kg。
回收率試驗
采用在實(shí)際樣品中加入不同添加水平的雙酚A標準溶液的方式進(jìn)行回收率實(shí)驗,按前處理方法處理后分析,采用外標法定量,每個(gè)添加水平單獨測3次,實(shí)驗結果表明,其平均回收率為85.78%~98.12%,RSD為397%~6.63%。
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