頂空氣相色譜法測定藥物中的有機溶劑殘留

  采用氣相色譜儀加FID檢測器和頂空進(jìn)樣器測定原料藥中殘留量有機溶劑，是一種普遍采用的、穩定分析方法，同時(shí)具有較好的重現性和回收率。

  頂空氣相色譜法的原理是：利用被測樣品（氣-液和氣-固）加熱平衡后，取其揮發(fā)氣體部分進(jìn)人氣相色譜儀。它于分析易揮發(fā)的微量成分，如對甲醇、乙醇等許多易揮發(fā)的有機溶劑類(lèi)；不同季節的花香氣、香水類(lèi)，帶有易揮發(fā)成分的中草藥類(lèi)；特殊氣味的蔬菜和調味品類(lèi)等均可用它進(jìn)行定量分析。頂空氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用法是用于對未知的揮發(fā)成分進(jìn)行定性分析的方法。

儀器與試劑

1.儀器：氣相色譜儀加FID檢測器；弱極性或中等極性氣相色譜柱；1-5uL微量注射器。

2.試劑：甲醇；乙腈；二氯甲烷；三氯甲烷；丙酮；正丙醇（均為分析純）；地塞米松磷酸鈉原料藥。

氣相色譜分析步驟

1.地塞米松磷酸鈉中丙酮的檢測

1.1溶液制備與測定

精密量取甲醇10μL（相當于7.9mg）與丙酮100μL（相當于79mg)，置于100mL容量瓶中，精密加0.1%(mL/mL）正丙醇（內標物質(zhì)）溶液20mL，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液；另取本品約0.16g，精密稱(chēng)定，置于l0mL容量瓶中，精密加入上述內標溶液2mL，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。取上述溶液，照氣相色譜法，按正丙醇計算的理論板數應大于700。含丙酮不得過(guò)5.0%(g/g)，并不得出現甲醇峰。

1.2計算

按下式計算定量校正因子（f）和檢品中丙酮的含量：

定量校正因子（f)＝A丙醇/A丙酮×m丙酮/m丙醇

樣品中丙酮的百分含量=供試品中丙酮峰面積/供試品中正丙醇峰面積×fm丙醇/樣品取樣量/10×100%

式中A——峰面積，cm2;

m——質(zhì)量，g。

2.頂空氣相色譜法測定有機溶劑甲醇、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷

2.1溶液制備

(1）取甲醇100μL、乙腈30μL、二氯甲烷10μL、三氯甲烷10μL，分別加不含有機物的純水至100mL，作為定位溶液。

(2）另取上述同樣量有機溶劑，混合，加無(wú)有機物的水至100.0mL，作為有機殘留溶劑的限度試驗對照溶液。取1mL對照溶液，加水至100.0ml,，測定有機溶劑的檢測限。

(3)取某藥物約0.3g，精密稱(chēng)定，加3.0mL無(wú)有機物的水使溶解［如果樣品在水中不溶，可用適當濃度的二甲基甲酰胺（DMF）水溶液溶解樣品］，作為供試品溶液。

 2.2分離度與系統適用性試驗

取定位溶液在上述色譜條件下測定，記錄色譜圖和保留時(shí)間。取對照溶液重復進(jìn)樣，計算各成分峰的分離度、柱效及色譜峰面積的相對標準差。另取對照溶液的稀釋液進(jìn)樣，計算藥物中各有機溶劑的檢測限。參照下表格式記錄色譜參數：

 2.3計算含量

樣品測定取供試品溶液，在上述色譜條件下進(jìn)樣，記錄色譜圖，外標法計算含量。

注意事項

1.氣相色譜儀色譜柱的使用溫度。各種固定相均有zui高使用溫度的限制，為延長(cháng)色譜柱的使用壽命，在分離度達到要求的情況下盡可能選擇低的柱溫。開(kāi)機時(shí)，要先通載氣，再升高汽化室、檢測室溫度和分析柱溫度，為使檢測室溫度始終高于分析柱溫度，可先加熱檢測室，待檢測室溫度近設定溫度時(shí)再升高分析柱溫度；關(guān)機前須先降溫，待柱溫降至50℃以下時(shí)，才可停止通載氣、關(guān)機。

2.進(jìn)樣操作。為獲得較好的氣相色譜儀分析精密度和色譜峰形狀，進(jìn)樣時(shí)速度要快而果斷，并且每次進(jìn)樣速度、留針時(shí)間應保持一致。

3.檢測器的使用。為避免被測物冷凝在氣相色譜儀檢測器上而污染檢測器，檢測器的溫度必須高于柱溫30℃，并不得低于100℃。FID點(diǎn)火時(shí)應關(guān)小空氣流量和開(kāi)大H2流量，待點(diǎn)燃后，慢慢調整到工作比例，一般空氣與氫氣的流量比為10:1，載氣（N2）與H2的流量比為(1：1)-（(1：1.5)。用峰高定量時(shí)，需保持載氣流速恒定。