在液相分析檢測樣品的過(guò)程中,液相色譜柱會(huì )受到來(lái)自于樣品及色譜系統的污染,從而導致色譜柱耐用性差、壽命縮短。
來(lái)自于色譜系統的污染主要指,HPLC儀器系統中部件磨損而產(chǎn)生的固體顆粒,以及流動(dòng)相系統過(guò)濾不*殘留的固體顆粒。來(lái)自于樣品的污染主要指,未*溶解的樣品或者已*溶解的樣品進(jìn)入色譜系統中,由于樣品溶劑和流動(dòng)相溶劑對樣品溶解存在的溶解度差異,導致沉淀析出污染系統。特別是對于中藥、天然產(chǎn)物、合成中間體及生物藥品的檢測,因基質(zhì)的復雜性,色譜柱受污染的情況會(huì )更加嚴重。污染會(huì )導致色譜系統壓力升高、色譜柱塌陷、填料變色等,從而帶來(lái)檢測成本高,測試結果不準確等各種影響。
保護柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材,使用保護柱可大大降低分析柱受污染的程度,延長(cháng)分析柱使用壽命。
保護柱位于進(jìn)樣器與分析柱之間, 作用主要兩方面:
1. 截留不溶性顆粒
2. 吸附樣品基質(zhì)中的雜質(zhì)
液相色譜柱以下幾種情況建議使用保護柱:
1. 中藥、天然產(chǎn)物及合成中間體等基質(zhì)較復雜的樣品分析——因溶解性差異導致樣品析出而污染分析柱的情況比較嚴重,梯度洗脫時(shí)影響更大。
2. 生物樣品分析——因樣品的不可逆吸附導致的污染,保護柱可先于分析柱承受這種污染,從而延長(cháng)分析柱壽命。
保護柱很重要,但選擇合適的保護柱更重要,選擇或使用不當也可能帶來(lái)截然相反的效果。
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